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更新時間：2025-10-25
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MCF7 MCF-7（人乳腺癌細胞）
目錄號 | KL-C1771H |
細胞英文(簡稱） | MCF7 [MCF-7] |
細胞名稱 | MCF7 [MCF-7]（人乳腺癌細胞） |
背景資料 | MCF-7細胞保留了多個分化了的乳腺上皮的特性，包括：能通過胞質(zhì)雌激素受體加工雌二醇并能形成圓形復合物（domes）。該細胞含有Tx-4癌基因。腫瘤壞死因子α（TNF alpha）可以抑制MCF-7細胞的生長?？勾萍に靥幚砑毎苷{(diào)變IGFBP’S的分泌。 |
代次 | P3 |
規(guī)格 | T25 |
細胞數(shù) | 1x10^6 cells |
價格 | ￥1200 |
生物安全級別 | 2 |
組織來源 | 腺癌，乳腺，胸水 |
細胞形態(tài) | 貼壁；上皮細胞樣 |
細胞活力 | 95％（Viability by Trypan Blue Exclusion） |
細胞檢測 | 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌 |
培養(yǎng)條件 | DMEM(高糖） +10% FBS+1%P/S；37℃，5% CO2 |
傳代方法 | 建議1:2-1:3 兩天換液一次 |
凍存條件 | 90?S+10%DMSO |
一、細胞收到后操作流程
1.收到細胞拿回實驗室后，先打開外包裝，用 75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，放到顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，細胞會有不同程度影響，先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，放到培養(yǎng)箱靜置4小時左右，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)(所拍照片作為后期售后依據(jù))。建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
3.貼壁細胞：若細胞生長密度超過 80%時，根據(jù)情況傳代，若細胞未超過 80%匯合度時，可將瓶裝的玩全培養(yǎng)液移入廢液缸中，原瓶（T25 瓶）保留 6-8ml 玩全培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度超過 80%以后再進行傳代。
4.懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體轉(zhuǎn)移至離心管，1000RPM 離心 5 分鐘，棄去上清液，管底細胞沉淀加入 10ml 玩全培養(yǎng)基吹打、重懸。放入新的細胞培養(yǎng)瓶/皿中培養(yǎng)過夜，根據(jù)細胞密度及生長情況分瓶傳代。
二、MCF7 MCF-7（人乳腺癌細胞）細胞常規(guī)培養(yǎng)步驟（請嚴格遵守無菌操作）
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入 5mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?6cm 皿中，加入約 6ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜），第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1）.棄去培養(yǎng)瓶中上清液，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2）.加 1-2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加 6ml 玩全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散。
3）.吹打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 5 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4）.將細胞懸液按 1：2 到 1：4 的比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM 條件下離心 5 分鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按 1：2 到 1：5 的比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按 1：2到 1：3 的比例分到新的含 6ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量咦酶，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM 條件下離心 5 分鐘，去除上清，
按凍存數(shù)量加入血清及 DMSO，凍存比例為 90?S+10%DMSO。
注意事項：
1. 收到細胞后請盡快更換為含10% FBS的新鮮培養(yǎng)基，不建議使用原瓶中運輸用培養(yǎng)基。
2. 如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時拍照并聯(lián)系實驗室。
3. 細胞任何售后問題，均需拍照存檔并及時聯(lián)系客服。
細胞用途：僅供科研使用，不能用于臨床診斷使用，細胞培養(yǎng)需要耐心與細心，希望您能獲得一個滿意的結(jié)果。
